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कैसे ऊतकों की एक संस्कृति बनाने के लिए

टिशू कल्चर एक तरह से शरीर के बाहर उन्हें बढ़कर दिए गए ऊतकों से अधिक कोशिकाओं को प्राप्त करने का एक तरीका है। एक बनाने के लिए, एक कृत्रिम वातावरण बनाना आवश्यक है जिसमें कोशिकाएं बढ़ेगी। एक बार जब वे सुसंस्कृत हो जाते हैं, तो उन्हें ऊतक जैव रसायन और नशीली दवाओं के विकास सहित विभिन्न प्रकार के अध्ययनों में इस्तेमाल किया जा सकता है।

चरणों

भाग 1
बढ़ने की तैयारी

एक टिशू कल्चर चरण 1 के शीर्षक वाला चित्र
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निर्धारित करें कि आप क्या करेंगे पौधे और पशु कोशिकाओं दोनों को विकसित करना संभव है। कभी-कभी यह एक पौधे या जानवर से सीधे निकाले जाने वाले ऊतकों को विकसित करने के लिए वांछित होता है। अन्य मामलों में, कोशिकाओं को पहले सुसंस्कृत और संग्रहीत सेल लाइन से सुसंस्कृत किया जाता है।
  • जीवों से ली गई ऊतकों से नई संस्कृतियां बनाई जा सकती हैं इन कोशिकाओं को प्राथमिक संस्कृति कहा जाता है वे केवल तभी विभाजित हो जाएंगे जब तक वे सत्ता में नहीं होते।
  • एक निरंतर सेल लाइन बनाने के लिए आपको इसे रसायनों या वायरस के उपयोग से बदलने की ज़रूरत होती है, ताकि कोशिकाओं को अनिश्चितकाल में विभाजित करना जारी रहे।
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    संस्कृति पर्यावरण तैयार करें आवश्यक परिस्थितियों को सेल के प्रकार के अनुसार अलग होगा, लेकिन सामान्य रूप से, यह प्रदान करने के लिए आवश्यक होगा:
    • तापमान नियंत्रित आदर्श तापमान आपके द्वारा विकसित होने वाले सेल के प्रकार के आधार पर अलग-अलग होंगे, लेकिन संभवतः 20-45 डिग्री सेल्सियस के बीच होगा
    • पीएच नियंत्रित सबसे अच्छा पीएच कहीं 6.0 और 7.5 के बीच होगा
    • नियंत्रित आसमाटिक दबाव
    • ऑक्सीजन और कार्बन डाइऑक्साइड का पर्याप्त आदान प्रदान
    • हार्मोन
    • विकास कारक
    • सब्सट्रेट जो अमीनो एसिड, कार्बोहाइड्रेट, विटामिन और खनिज जैसे आवश्यक पोषक तत्वों के साथ कोशिकाओं को प्रदान करता है।
    • प्रकाश। प्रकाश महत्वपूर्ण है यदि आप पौधों की कोशिकाओं को विकसित करना चाहते हैं, जो प्रकाश संश्लेषण करते हैं।
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    निर्धारित करें कि किस प्रकार के सब्सट्रेट प्रदान करेगा सब्सट्रेट से जुड़ा होने पर कई कोशिकाओं को सर्वश्रेष्ठ विकसित होते हैं। प्रकार शामिल हैं:
    • सब्सट्रेट ठोस, जिसे पक्षपाती भी कहा जाता है। गुर्दे जैसे अंगों से प्राप्त ऊतक आमतौर पर अनुयायी होते हैं क्योंकि ये संयोजी ऊतक में तय हो जाते हैं।
    • अर्ध-ठोस या मोनोलायर सब्सट्रेट इस प्रकार की संस्कृति अक्सर कंटेनर के नीचे कोशिकाओं की एक परत बनाती है।
    • सस्पेंशन संस्कृति इस प्रकार की कोशिकाओं को सब्सट्रेट पर लंगर डालना नहीं चाहिए। इसके बजाय, वे फ्लोटिंग बढ़ते हैं। रक्त कोशिकाओं को आमतौर पर निलंबन में सुसंस्कृत किया जाता है

    • भाग 2
    संस्कृति को बाहर ले जाना




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    फसल को शुरू करने के लिए निर्माता के प्रोटोकॉल का पालन करें। ऐसी कई कंपनियां हैं जो प्रयोगशालाओं को फसलों के संचालन के लिए सामग्री और उपकरण प्रदान करती हैं। जब आप सामग्री हासिल करते हैं, तो आप संस्कृति को शुरू करने के लिए प्रोटोकॉल भी प्राप्त करते हैं। वे वर्णन करते हैं कि आप जिस नमूना को आप संस्कृति पर्यावरण में खेती करना चाहते हैं उसे स्थानांतरित करना चाहिए। कुछ प्रसिद्ध कंपनियों में शामिल हैं:
    • आणविक ब्राजील
    • Qiagen
    • फ़िशर वैज्ञानिक
    • थर्मो वैज्ञानिक
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    कोशिकाओं को भोजन करें यदि वे स्तनपायी हैं आम तौर पर संस्कृति माध्यम को हर 2-3 दिनों में फिर से भरना चाहिए। कोशिकाओं को शक्ति के लिए निर्माता के प्रोटोकॉल का पालन करें।
    • इस प्रक्रिया को 20 मिनट या इससे कम लेना चाहिए
    • यदि आप सही मात्रा में पोषक तत्व प्रदान नहीं करते तो कोशिका मर जाएंगे।
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    संस्कृतियों को विभाजित करते हैं जब वे भीड़भाड़ना शुरू करते हैं। संस्कृति को बढ़ाना, कुछ कोशिकाओं को एक नया, निचला घनत्व डिस्क पर स्थानांतरित करना आवश्यक हो सकता है। इससे मूल संस्कृति और नई संस्कृति दोनों को आगे बढ़ने की अनुमति मिल जाएगी।
    • भविष्य में काम करने के लिए कुछ फसल को फ्रीज करना संभव है या यदि दूषित होने पर प्रयोग दोहराते हैं। संस्कृतियों के क्रियोपेशेशेशन या फ्रीजिंग तापमान निर्धारित करने के लिए प्रदान किए गए प्रोटोकॉल का पालन करें।

    • सूत्रों और कोटेशन

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